分析方法与价值分配
CRM-AZA1-b的认证值基于NRC使用两种独立方法获得的结果:使用高纯度咖啡因标准品进行外部校准的AZA1储备溶液的定量NMR光谱[7]和使用CRM-AZA1(批号20060719)进行校准的中性pH流动相的LC-MS/MS。值得注意的是,CRM-AZA1-b的认证值是作为AZA1和差向异构体37-epi-AZA1[8]的浓度之和计算的。差向异构体用中性流动相柱系统(如图2A所示)从AZA1中分离,但用一些更常用的流动相柱体系(如图2B所示),化合物可能无法解析。在先前进行的研究[8]的基础上,当结合AZA1和37-epi-AZA1的峰面积时,假设了等摩尔响应因子。37-epi-AZA1的峰面积对应于AZA1和37-epi-ZA1的总峰面积的大约3.5%。
原多甲藻酸毒素1标准品CRM-AZA1-b同质性
代表性数量(n=21)的CRM-AZA1-b安瓿选自整个填充系列。通过LC-MS/MS测量,观察到良好的均匀性。计算AZA1(0.8%)的瓶间均匀性引起的相对不确定度,并用于最终的组合不确定度。
原多甲藻酸毒素1标准品 稳定性研究
对CRM-AZA1进行了短期和长期稳定性研究。由于CRM-AZA1-b的生产工艺和浓度是等效的,因此合理地假设了可比较的稳定性。稳定性研究表明,在-12°C或更低温度下,AZA1在一年内没有显著降解。10天后,在高达+37°C的温度下未观察到显著降解;然而,在该温度下一年后的降解是显著的。
不确定性
考虑并定量了与CRM-AZA1-b表征相关的所有合理误差来源。包括与所使用的两种分析方法相关的组合不确定度分量(µchar)。总体不确定度估计(UCRM)包括与批次表征(µchar)、瓶间变化(µhom)和长期储存期间的不稳定性(µstab)相关的不确定性[9] . 表2中列出了这些组件,它们的组合和扩展如下:
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