ERM-AD623 BCR-ABL pDN标准品使用步骤

ERM-AD623 BCR-ABL pDN标准品使用步骤–ERM-AD623旨在校准测量BCR-ABL b3a2转录物的数量与下列对照之一的转录物数量的关系基因：BCR、ABL或GUSB。认证表A1和A2中列出的一般PCR条件报告用于获得ERM-AD623的认证拷贝数浓度。有限的可交换性研究表明，ERM-AD623可以校准认证附录H中列出的不同qPCR方法汇报ERM-AD623对BCR-ABL b2a2转录物定量的适用性必须是已证实的ERM-AD623可直接或间接用于患者cDNA样本的常规分析用于校准内部质粒标准品。该组包含六种浓度，应用于构建两种BCR-ABL b3a2转录物和选择的对照基因。副本编号上的认证值浓度是指双链质粒的拷贝数，这些值应乘以2，当测量来自患者的单链cDNA样品时。对于来自患者的cDNA样本：BCR-ABL片段/对照基因片段的拷贝数比和拷贝对照基因片段的数量浓度。作为BCR-ABL b3a2转录物和对照基因转录物位于同一质粒上，ERM-AD623对BCR-ABL片段/对照基因拷贝数比测量值的不确定度碎片可以忽略不计。当报告对照基因片段的拷贝数浓度时ERM-AD623质粒溶液的认证拷贝数浓度的不确定度必须考虑在内。为了降低污染风险，应在层流柜。执行以下操作时应特别小心，避免形成气溶胶实验。BCR-ABL pDN标准品

材料说明–ERM-AD623是双链质粒DNA的六种溶液的集合（ERM-AD621a、ERM-AD622b、ERM-Ad623c），ERM-AD623c、ERM-AD624d、ERM-AD 623e和ERM-AD621f）。质粒含有一个特定的DNA片段来自断裂簇区基因（BCR）和c-abl癌基因1（abl）的融合转录物，称为BCRABLb3a2转录物。此外，质粒还含有来自BCR转录物的特异性DNA片段β基因（GUSB）转录物。将该质粒稀释至六种不同浓度水平。溶液由1 mmol/L Tris、0.01 mmol/L EDTA pH 8.0制成，并补充50 ng/μL从大肠杆菌中转移RNA。六个小瓶中的每一个都含有大约600μL的质粒溶液。ERM-AD623发布后，进行了一项额外的研究，使最小进样量为5μL至2μL。

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