结构确认和纯度评估
NRC标准品蛤毒素-2认证校准溶液CRM-PTX2-b通过1H核磁共振（NMR）（图1）和LC-MS/MS证实了用于制备CRM-PTX2-b的PTX2的结构和纯度。产物离子光谱显示出PTX2特有的碎裂。LC-MS还用于估计PTX2-b储备溶液的一般纯度（柱：2.5µm Luna C18（2），100×2 mm；水（A）、分别含有2mM甲酸铵和50mM甲酸的乙腈/水（95/5）（B）（pH 2.3）；以200µL/min的速度在15分钟内达到5至100%的B+20°C柱温）。观察到一种部分溶解、未鉴定的异构体和PTX2c（图2）。使用等度LC法（柱和流动相如上；55%B，250µL/min；+20°C柱温），杂质相对于PTX2的保留时间分别为1.07和2.05。当在等度洗脱和选定离子监测（SIM）条件下监测时，CRM溶液含有约2.5%的未解析异构体和2.6%的PTX2c。这些次要化合物的比例仅作为信息值提供，未经认证。
同质性
NRC标准品蛤毒素-2认证校准溶液CRM-PTX2-b在填充系列中选择代表性数量的安瓿（n=30），以确定CRM-PTX2-b的均匀性。通过LC-MS进行分析（图3）。测得瓶间变化小于一种溶液重复分析的变化（RSDn=16时<5%），从而在整个安瓿范围内证明了可接受的均匀性。
稳定性
CRM-PTX2（批号20021127）在甲醇中的短期和长期稳定性先前使用经典稳定性研究设计进行了评估。CRM-PTX2-b是以相同的方式制备的，并且合理地假设了等效的稳定性。在30天的时间里，在+20°C的温度下没有观察到PTX2的降解，这表明在短期内具有良好的稳定性。然而，在+37°C下30天后，PTX2的降解确实变得显著。针对每个储存温度计算1年长期稳定性数据的回归，并测试其显著性。回归是
发现在+4°C以下的所有条件下都是无关紧要的。使用-12°C斜率的标准误差确定了与长期稳定性评估相关的不确定性（见“不确定性”一节）。长期稳定性的相对不确定度（µlts）为0.77%。CRM-PTX2-b的建议储存温度为-12°C。
认证价值
NRC标准品蛤毒素-2认证校准溶液CRM-PTX2-b的认证值为5.13±0.15µmol/L（表1），基于加拿大国家研究委员会（NRC）在SIM模式下使用定量NMR（qNMR）光谱[5]和LC-MS获得的结果。对于qNMR，使用高纯度咖啡因标准品作为校准品对纯化的PTX2-b储备溶液的三个NMR管进行分析和定量。对于LC-MS，从整个填充系列中选择六支安瓿，并使用CRM-PTX2（批号20021127）作为校准品一式三份注射。本证书中显示的结果可通过重量法制备的已确定纯度的标准品追溯到SI标准。本产品可作为实验室质量保证计划的合适参考材料。
不确定性
考虑并定量了与CRM-PTX2-b表征相关的所有合理误差来源。通过qNMR和LC-MS对CRM-PTX2-b进行定量分析，得出表征不确定度（µchar）值为0.065µM。对CRM-PTX2-b进行了广泛的同质性研究，未发现显著的异质性。当以µmol/L表示时，长期稳定性的不确定度（µstab）确定为0.039µM。将所有这些不确定性来源与覆盖因子2相结合，以估计与CRM-PTX2-b的认证值相关的最终不确定性
存储说明
NRC标准品蛤毒素-2认证校准溶液CRM-PTX2-b为确保CRM-PTX2-b的稳定性，该材料应在-12°C或以下未开封的条件下储存。同样，该材料的任何稀释液都应储存在-12°C的低顶空小瓶中。
有效期
如果在建议的储存条件下未开封储存，CRM-PTX2-b的认证浓度自销售之日起有效期为1年。
使用说明
NRC标准品蛤毒素-2认证校准溶液CRM-PTX2-b打开前，应将每个安瓿加热至室温，并将内容物充分混合。安瓿应在预先刻好的标记处打开。安瓿打开后，应使用校准的容量设备取出准确的等分试样，并将其转移到容量瓶或小瓶中。如果溶液打开超过几分钟，则会因甲醇蒸发而导致浓度增加。建议CRM-PTX2-b的溶液不应蒸发至干，因为玻璃表面可能会分解。注：溶液的体积未经认证。因此，安瓿的全部内容物不应简单地转移到容量瓶中并稀释至一定体积。
安全说明
PTX最初被归类为腹泻性贝类毒素，因为它们同时存在于浮游生物和含有冈田酸基团毒素的贝类中；然而，它们尚未在小鼠喂养研究中证明口服毒性，也未与任何人类中毒事件直接相关[3]。然而，在处理CRM-PTX2-b时应采取预防措施。吸入和摄入甲醇是有害的；摄入可能导致失明或死亡，而长时间的皮肤接触可能导致皮炎和/或肾脏损伤。只有合格的人员才能处理溶液，并应使用适当的处理方法。如果玻璃破碎，打开安瓿时应使用重型手套和护目镜。CRM-PTX2-b可提供材料安全数据表（MSDS）。